Mis on neutraalne proteaas?
Neutraalne proteaas on õrn, -kiiresti toimiv metalloproteaas (tavaliselt Bacillus polymyxa või Bacillus subtilis), mis töötab optimaalselt pH 5,9–7,5 juures, et hüdrolüüsida mitte-polaarseid aminohappejääke. Seda kasutatakse laialdaselt rakkude eraldamiseks ja kudede dissotsiatsiooniks, eraldades tõhusalt epidermise pärisnahast, säilitades samal ajal rakumembraani terviklikkuse.
Kõik, mida pead teadma
Mis on neutraalne proteaas?
Neutraalne proteaas (dispaas) dissotsieerib fibroblasti{0}}sarnaseid rakke tõhusamalt kui epiteeli-sarnaseid rakke, seega on seda kasutatud ka diferentsiaalseks isoleerimiseks ja kultiveerimiseks. Teised eelised on selle mitte-imetajate (bakteriaalne) allikas ja võime inhibeerida EDTA-d.
Kes ei peaks proteaasi võtma?
Mõned võivad põhjustada allergilisi reaktsioone. Üksikasjalikuma ohutusteabe saamiseks vaadake konkreetseid proteolüütilisi ensüüme. Rasedus ja imetamine: ei ole piisavalt usaldusväärset teavet, et teada saada, kas proteolüütiliste ensüümide kasutamine raseduse või rinnaga toitmise ajal on ohutu. Olge kindlal poolel ja vältige kasutamist.
Mida proteaas teie kehaga teeb?
Seega reguleerivad proteaasid paljude valkude saatust, lokaliseerumist ja aktiivsust, moduleerivad valkude{0}}interaktsioone, loovad uusi bioaktiivseid molekule, aitavad kaasa raku teabe töötlemisele ning genereerivad, edastavad ja võimendavad molekulaarseid signaale.
Millised on proteaasi kõrvaltoimed?
Proteaasi inhibiitorite sagedased kõrvaltoimed
Kõhuvalu.
Iiveldus ja oksendamine.
Kõhulahtisus.
Lööve.
Köha.
Väsimus.
Neerukivid.
Rasva ümberjaotumine kehas (lipodüstroofia).
Peamised üksikasjad:
Tegevus:See on amino-endopeptidaas, mis lagundab rakuvälise maatriksi (ECM) komponente, nagu fibronektiin ja kollageen IV, kahjustamata rakke endid.
Rakukultuuri kasutamine:Väga eelistatud primaarses rakukultuuris ja kudede dissotsiatsioonis, kuna see pakub rakkude "õrnat" vabanemist.
Kudede dissotsiatsioon:Seotakse sageli kollagenaasiga, et parandada spetsiifiliste rakkude, näiteks hepatotsüütide või pankrease saarekeste vabastamise tõhusust.
Muud kasutusalad:Lisaks teadustööle kasutatakse neutraalseid proteaase toiduainetööstuses liha pehmendamiseks, pagaritööstuses ja piimatöötlemisel (nt juustutootmine), kuna need võivad lagundada valke ja parandada tekstuuri.
Inhibiitorid:Selle aktiivsus sõltub tsingi- ja kaltsiumioonidest ning seda inhibeerib EDTA või EGTA.
Neutraalne proteaas (dispaas) on Bacillus polymyxa toodetud bakteriaalne ensüüm, mis hüdrolüüsib mitte-polaarsete aminohappejääkide N-otsa peptiidsidemeid ja on klassifitseeritud amino-endopeptidaasiks. Selle kerge proteolüütiline toime muudab ensüümi eriti kasulikuks primaarsete ja sekundaarsete (subkultiveerimise) rakkude eraldamiseks, kuna see säilitab rakumembraani terviklikkuse.
Neutraalset proteaasi (dispaasi) kasutatakse sageli ka sekundaarse ensüümina koos kollagenaasi ja/või teiste proteaasidega paljudes primaarsetes rakkude eraldamise ja koe dissotsiatsiooni rakendustes. Neutraalne proteaas (dispaas) dissotsieerib fibroblasti{1}sarnaseid rakke tõhusamalt kui epiteeli{2}}sarnaseid rakke, seega on seda kasutatud ka diferentsiaalseks isoleerimiseks ja kultiveerimiseks. Teised eelised on selle mitte--imetajate (bakteriaalne) allikas ja võime inhibeerida EDTA-d.
ANALÜÜTILISED TULEMUSED
| Testi üksus | Meetod / viide | Spetsifikatsioon | Tulemus | Järeldus |
|---|---|---|---|---|
| Identifitseerimine | Majasisene-ID/sildi nõue | Neutraalne proteaas (EC 3.4.24.24) | Vastab | Läbida |
| Välimus | Visuaalne | Val{0}}valge kuni helekollane pulber | Vastab | Läbida |
| Ensüümi aktiivsus | AOAC või ettevõttesisene{0}}analüüs | NLT 1000 U/g | 1,200 U/g | Läbida |
| pH (1% lahus) | pH-meeter | 6.0 – 8.0 | 6.5 | Läbida |
| Niiskus | Gravimeetriline / USP 731 | 6,0% või vähem | 4.5% | Läbida |
| Tuhk | Gravimeetriline / USP 281 | Vähem kui 5,0% või sellega võrdne | 3.2% | Läbida |
| Valgusisaldus | Kjeldahli meetod | 40% või suurem | 42.3% | Läbida |
| Plaatide koguarv | Plaatide arv | Vähem kui 10 000 CFU/g või sellega võrdne | 4300 CFU/g | Läbida |
| Pärm ja hallitus | Plaatide arv | Vähem kui 100 CFU/g või sellega võrdne | <10 CFU/g | Läbida |
| Kolibakterid | Plaatide arv | Vähem või võrdne 30 CFU/g | <10 CFU/g | Läbida |
| E. coli | Puudumise test | Negatiivne / 25g | Ei tuvastatud | Läbida |
| Salmonella | Puudumise test | Negatiivne / 25g | Ei tuvastatud | Läbida |
| Plii (Pb) | ICP-MS / ICP-OES | Vähem kui 5 mg/kg või sellega võrdne | 0,18 mg/kg | Läbida |
| Arseen (As) | ICP-MS / ICP-OES | Vähem kui 3 mg/kg või sellega võrdne | 0,12 mg/kg | Läbida |
Tootmisprotsess
